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L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測(cè)試盒

簡(jiǎn)要描述:

L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測(cè)試盒是合成AsA的主要途徑。Gal LDH位于線粒體內(nèi)膜,負(fù)責(zé)催化植物體內(nèi)AsA生物合成的最后一步,也是該途徑的關(guān)鍵酶之一,對(duì)植物體內(nèi)AsA含量的積累起著至關(guān)重要的作用。

更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1479

商品詳情:
L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測(cè)試盒測(cè)定意義:

L-半乳糖途徑是合成AsA的主要途徑。Gal LDH位于線粒體內(nèi)膜,負(fù)責(zé)催化植物體內(nèi)AsA生物合成的最后一步,也是該途徑的關(guān)鍵酶之一,對(duì)植物體內(nèi)AsA含量的積累起著至關(guān)重要的作用。

貨號(hào)

規(guī)格

檢測(cè)方法

YSH3223

100管/96樣

微量法

YSH3223-1

50管/48樣

可見(jiàn)分光光度法

測(cè)定原理:

Gal LDH催化L-半乳糖內(nèi)酯還原細(xì)bao色素C(Cyt c),還原型Cyt c在550nm有吸收峰;測(cè)定還原型Cyt c增加速率,來(lái)計(jì)算Gal LDH活性。

自備儀器和用品:

臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取:

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3.血清等液體:直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。

半抑制劑7ELISA試劑盒 CST7免費(fèi)代測(cè)試劑

半抑制劑6ELISA試劑盒 CST6免費(fèi)代測(cè)試劑

半抑制劑5ELISA試劑盒 CST5免費(fèi)代測(cè)試劑

半抑制劑4ELISA試劑盒 CST4免費(fèi)代測(cè)試劑

半抑制劑2ELISA試劑盒 CST2免費(fèi)代測(cè)試劑

半抑制劑11ELISA試劑盒 CST11免費(fèi)代測(cè)試劑

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斑聯(lián)蛋白ELISA試劑盒 ZYX免費(fèi)代測(cè)試劑

白細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1ELISA試劑盒 LST1免費(fèi)代測(cè)試劑

白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族A成員3ELISA試劑盒 LILRA3免費(fèi)代測(cè)試劑

白細(xì)胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體2ELISA試劑盒 LAIR2免費(fèi)代測(cè)試劑

白細(xì)胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體1ELISA試劑盒 LAIR1免費(fèi)代測(cè)試劑

白三烯A4ELISA試劑盒 LTA4免費(fèi)代測(cè)試劑

白介su9受體ELISA試劑盒 IL9R免費(fèi)代測(cè)試劑

白介su4誘導(dǎo)蛋白1ELISA試劑盒 IL4I1免費(fèi)代測(cè)試劑
L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測(cè)試盒轉(zhuǎn)氫酶-2測(cè)試盒/微量法100管/96樣

總氨基(T-AA)測(cè)試盒/比色法80管/78樣

總超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒/WST-1法48T

總超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒/WST-1法96T

總超氧化物歧化酶(T-SOD)測(cè)試盒/羥胺法50管/48樣

總超氧化物歧化酶(T-SOD)測(cè)試盒/羥胺法100管/96樣

(TC)含量測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

(TC)含量測(cè)試盒/微量法100T/96S

總蛋白(TP)測(cè)試盒/考馬斯亮藍(lán)法100管/96樣


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